超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography, UPLC）借助于HPLC（高效液相色谱）的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本相同，所改变的地方有以下几点：

（1）小颗粒、高性能微粒固定相的出现：高效液相色谱的色谱柱，例如常见的十八烷基硅胶键合柱，它的粒径是5 μm，而超高效液相色谱的色谱柱，会达到3.5 μm，甚至1.7 μm。这样的孔径更加利于物质分离；

（2）超高压输液泵的使用：由于使用的色谱柱粒径减小，使用时所产生的压力也自然成倍增大。故液相色谱的输液泵也相应改变成超高压的输液泵；

（3）高速采样速度的灵敏检测器；

（4）使用低扩散、低交叉污染自动进样器：配备了针内进样探头和压力辅助进样技术；

（5）仪器整体系统优化设计：色谱工作站配备了多种软件平台，实现超高效液相分析方法与高效液相分析方法的自动转换。

与传统的HPLC相比，UPLC缩短了分析时间，同时减少了溶剂用量降低了分析成本。